고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)는 액체를 이동상으로 사용하는 분석 기술입니다. 단일 용매 또는 혼합 용매, 완충액 및 기타 이동상을 고압 주입 시스템을 통해 고정상이 포함된 크로마토그래피 컬럼으로 펌핑합니다. 크로마토그래피 컬럼 내에서는 고정상 및 이동상과의 서로 다른 상호 작용력으로 인해 시료의 구성 요소가 효과적으로 분리됩니다. 그 후, 이렇게 분리된 구성 요소는 상세한 분석을 위해 검출기로 들어가며, 이를 통해 시료에 대한 포괄적인 분석이 이루어집니다.
이 원리는 액체-고체 또는 두 개의 비혼화성 액체 사이의 혼합물 분포 비율의 차이에 기초합니다. 이 방법은 끓는점이 높고, 증발하기 어렵고, 열적으로 불안정하고 생물학적 활성을 갖는 물질의 분석에 특히 적합합니다. 동시에 고성능 액체 크로마토그래피는 키랄 분석에도 널리 사용되어 화학, 생물학 및 의학 분야 연구에 중요한 기술 지원을 제공합니다.
장비 시작: 먼저 컴퓨터와 크로마토그래프의 전원 스위치를 차례로 켜서 장비를 시작합니다.
워크스테이션에 로그인: 액체 크로마토그래피 워크스테이션에 로그인하여 후속 작업을 준비합니다.
구성 및 매개변수 설정: 기기 구성을 선택한 후 이동상 비율, 검출기 감도 등 필요한 매개변수를 설정합니다.
기기 자체 테스트 및 방법 수립: 기기 자체 테스트를 시작하여 기기 상태가 양호한지 확인합니다. 자체 테스트를 통과한 후 실험 요구 사항에 따라 해당 방법을 설정합니다.
시스템 균형: 데이터 수집을 시작하기 전에 균형 잡힌 상태를 달성하기 위해 시스템이 일정 기간 동안 설정된 조건에서 실행되고 있는지 확인하십시오.
데이터 수집: 기준선이 안정되면 수동 주입을 수행합니다. 데이터 수집 인터페이스에서 시작 아이콘을 클릭하면 데이터 수집이 시작됩니다. 수집 후 크로마토그래피 파일을 저장합니다.
데이터 분석 및 보고서 출력: 메인 인터페이스에서 데이터 분석 기능을 선택하고 처리 및 분석을 위해 크로마토그래피 파일을 엽니다. 분석이 완료되면 보고서가 출력되고 테스트가 종료됩니다.
종료 및 청소: 종료하기 전에 기계를 충분한 시간 동안 작동시키고 이동상으로 컬럼을 완전히 세척하여 잔류물이 없는지 확인한 후 기계를 종료하십시오.
안전한 작동: 개인의 안전과 기기의 청결을 보장하기 위해 항상 바늘과 샘플과 접촉할 수 있는 부위에 손이 직접 닿지 않도록 하십시오.
바늘 세척 작업: 샘플을 흡입하기 전에 바늘을 에탄올이나 메탄올로 조심스럽게 세척하여 불순물이나 잔류물을 제거해야 합니다.
기포 제거: 주사기 샘플링 과정에서 기포가 섞이지 않도록 하십시오. 적절한 흡입 속도를 유지하면서 바늘을 위쪽으로 향하게 하고 바늘 튜브를 가볍게 치면 기포를 제거할 수 있습니다.
삽입 속도 및 깊이: 각 시료 주입의 속도와 깊이가 일정하게 유지되도록 삽입이 빠르고 안정적이어야 하며, 이는 분석 결과의 정확성을 보장하는 핵심입니다.
시료 주입: 바늘 끝이 기화실 중앙에 삽입되면 시료가 완전히 기화되고 효과적으로 분석될 수 있도록 시료 주입을 시작해야 합니다.
공기 누출 확인: 가스화실의 압력이 떨어지거나, 피크 모양이 낮아지거나, 폭이 커지는 것으로 확인되면 공기 누출로 인한 것일 수 있습니다. 이때, 기기의 정상적인 작동을 복원하려면 밀봉 링을 적시에 교체해야 합니다.
주사용 바늘의 분류: 가스 크로마토그래프와 액체 크로마토그래프의 주사용 바늘은 혼합할 수 없습니다. 가스 크로마토그래프는 뾰족한 바늘을 사용하고, 액체 크로마토그래프는 평평한 바늘을 사용합니다. 혼합하면 기기가 손상되거나 부정확한 분석 결과가 발생할 수 있습니다.
매개변수 안정성: 테스트 과정에서 기기 매개변수의 안정성이 유지되어야 하며 분석 결과의 정확성을 보장하기 위해 매개변수를 임의로 피해야 합니다.
데이터 보안: 데이터 보안과 무결성을 보장하기 위해 자신의 USB 플래시 드라이브를 사용하여 데이터를 복사하지 마십시오.
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